今天给各位分享kasp标记的知识,其中也会对KASP标记分型进行解释,如果能碰巧解决你现在面临的问题,别忘了关注本站,谢谢!
本篇文章目录概览:
SNP分型-KASP法介绍
1、SNaPshot法:该技术由美国应用生物公司(ABI)开发,是基于荧光标记单碱基延伸原理的分型技术,也称小测序,主要针对中等通量的SNP分型项目。
2、这时候就不得不选择SNP maker了。如果筛选的交换单株比较少,则可以对每个交换单株进行一代的sanger测序来确认每个F2代的基因型。如果筛选的F2代单株较多,则可以使用KASP技术对F2代单株进行基因分型。
3、SNP分型技术的新里程:KASP法的崛起 在生命科学研究与医学领域,SNP分型技术的进步引领了基因检测的革新。其中,KASP(Kompetitive Allele Specific PCR)方法因其独特的优势,正在成为第三代DNA分子标记技术的明星选手。
如何用PCR的方法检测已知点突变
我接触国的点突变检测方法包括:KASP、TaqMAN标记都是可以通过PCR区分点突变的。2,PCR产物测序。3,CEL I酶切,最早的突变筛选就是用的这酶。
如果变异部位位于基因的中间,可以使用重组PCR进行,在需要诱变的位置合成一对含有变异序列的互补寡核苷酸,然后分别与5引物和3引物进行PCR,这样便可得到两个PCR产物,分别含有变异序列。
基因突变检测方法:PCR-SSCP法是在非这性聚丙烯酰胺凝胶上,短的单链DNA和RNA分子依其大街基序列不同而形成不同构象,一个碱基的改变将影响其构象而导致其在凝胶上的移动速度改变。
可以检出杂合性突变,在突变位置上可见明显的双峰且高度约为正常峰值的一半。PCR直接测序有一定困难。关键是看引物和纯化。但只要引物合成纯度好,加上合适的纯化方法,测序上应该是没有问题的。
最早接触PCR是在做科创和本科毕业论文相关实验的时候,通过扩增野生型菌株和突变体菌株的某个基因,然后通过AS-PCR方法,设置温度梯度,筛选一对能够区别S和M菌株的特异性引物。
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